多肽合成概述及原理（及相关合成仪器）

        多肽是参与生物体各种细胞功能的生物活性物质。它是一种分子结构介于氨基酸和蛋白质之间的化合物。它是由多种氨基酸按一定顺序通过肽键组合而成。迄今为止，人们已发现并分离出存在于人体内的一百多种肽。多肽的研究和利用呈现出qian所未有的繁荣。
        多肽的合成不仅具有非常重要的理论意义，而且具有重要的应用价值。通过肽合成，可以验证新的肽结构；新肽旨在研究结构和功能之间的关系；为肽生物合成反应机制提供重要信息；建立模型酶，合成新的多肽药物。
         1963年，RBMerrifield建立了一种固相合成方法，将多肽羧基末端的氨基酸固定在不溶性树脂上，然后将氨基酸依次偶联到树脂上，延长肽链，合成多肽。在固相法中，每一步反应后只需简单清洗树脂即可达到提纯的目的。它克服了经典液相合成方法每一步都难以纯化产物的难题，为多肽的自动化合成奠定了基础。为此，梅里菲尔德获得了 1984 年的诺贝尔化学奖。
         Merrifield建立的Boc合成方法使用TFA（三氟yi酸）去除Boc（叔丁氧羰基）作为α-氨基?；せ牛嗔幢；な褂帽郊状?。在合成过程中，Boc-氨基酸衍生物与树脂共价交联，Boc用TFA去除，游离氨基末端用三乙胺中和，然后下一个氨基酸被DCC活化并偶联。最终脱?；ざ嗖捎肏F法或TFMSA（三氟甲磺酸）法。 Boc法已成功合成了许多生物大分子，如活性酶、生长因子、人工蛋白质等。
        在 Boc 合成方法中，反复使用酸进行脱保护。这种处理带来了一些问题：例如，在肽和树脂的连接处，每次用50%的TFA去除Boc基团时，大约有1.4%的肽从树脂上脱落。合成的肽链越长，损失越严重。另外，酸处理会引起侧链的一些副反应。 Boc合成法特别不适合合成色氨酸等不稳定的酸。肽。 1978 年，Chang、Meienlofer 和 Atherton 等人。使用 Carpino 报道的 Fmoc（9-芴基甲氧羰基）基团作为 α-氨基保护基团形成Fmoc固相合成多肽成功。 Fmoc法与Boc法的根本区别在于使用碱可除去的Fmoc作为α-氨基的?；せ?，侧链?；な褂肨FA-可除去的叔丁氧基。该树脂使用 90% TFA 可去除对。烷氧基苄醇类树脂，最终脱?；け苊馇克岽?。
        自Merrifield成功开发固相肽合成法以来，经过不断改进和完善，固相法已成为当今肽和蛋白质合成中的常用技术，显示出液相合成法wu法比拟的优势。近几十年来，多肽的固相合成以其省时、省力、省料、易计算机控制、易于推广等突出优点成为多肽合成的常规方法。各种基于Boc和Fmoc方法的自动肽合成仪也相继出现，并且还在不断的开发和改进中。
        固相合成的基本原理
        肽合成是一个重复添加氨基酸的过程。固相合成的顺序一般是从C端（羧基端）到N端（氨基端）合成。过去，肽的合成是在溶液中进行的，称为液相合成。现在多采用固相合成，大大降低了每一步产品纯化的难度。为防止副反应的发生，对参与反应的氨基酸侧链进行保护；羧基末端是游离的，必须在反应前活化。有两种化学合成方法，即Fmoc和tBoc。由于Fmoc比tBoc有很多优点，所以大部分都是用Fmoc方法合成的。
        每个循环由以下三步反应组成，循环重复，直到肽链达到所需长度。
         1、脱?；ぃ篎moc保护的氨基酸必须用碱性溶剂（哌啶）脱去氨基的?；せ?。
         2、活化：被连接的氨基酸的羧基被活化剂活化。
         3.偶联：活化的羧基与前一个氨基酸暴露的氨基反应形成肽键。在该步骤中使用过量的试剂来推动反应完成。
            PSI多肽合成仪特点：
         ü 采用316L不锈钢制造，zui大程度防止肽合成试剂的腐蚀。
         ü *的设计可以大大节省客户的运营成本。
         ü 不同规格的电抗器可自由更换，最多可使用一台仪器。
         ü 气液输送系统均采用电磁阀组合设计，*实现自动控制。
         ü 采用全自动试剂循环系统（PSI200除外），可为客户直接节省50%的试剂。
         ü 采用上下180度搅拌方式，反应**，偶联率高。
         ü 可实现在线裂解，反应**，裂解效果优于有死角的搅拌法。
         ü 全系列*实现线性放大。
         ü 自动清洗送液管路功能。
         1、PSI合成规模参考标准
        PSI合成规模以ABI433A肽合成仪技术标准为参考标准
        1）反应器体积：8ml，最佳合成规模：0.10mmol
         2）反应器体积：41ml，最佳合成规模：0.25/0.50mmol
         3）反应器体积：55ml，最大（经验）合成规模：1.0mmol
         2、PSI理论合成收率计算标准
        1）大多数多肽的分子量在500~5000（mg/mmol）之间；
         2）合成收率zui低的分子量为1000，收率最高的分子量为4000；
         3）合成规模为0.01～0.1mmol，则合成收率为10 (0.01X1000) 至 400 (0.1X4000) 毫克；
         3、PSI对合成规模的理解
        1）液体输送管道的粗细和电磁阀的尺寸是决定合成器合成规模的基本因素；
         2）同类型仪器与合成规模相差6-8倍，更经济合理。
         4、PSI标准规格合成器的合成音阶